mínima para la publicación de experimentos de PCR cuantitativa en tiempo real y
es un conjunto de directrices que describen la mínima información necesaria para
evaluar las publicaciones sobre la PCR en tiempo real, también llamada PCR
cuantitativa o qPCR. Las directrices MIQE se han desarrollado bajo la tutela de
Stephen A. Bustin, profesor de Medicina Molecular, un experto en PCR
cuantitativa de fama mundial y autor del libro A-Z of Quantitative PCR [todo
sobre la PCR cuantitativa], que ha sido denominado “la biblia de la qPCR”.
En última instancia, la confiabilidad de los resultados de RT-qPCR
depende de la estandarización de mediciones, especialmente cuando se
utiliza como herramienta de diagnóstico. Una forma imprescindible de lograr
una cuantificación confiable es incluir una molécula de ARN de número de copias
conocido como un pico de ARN (lo que los CDC reconocen no tener).
La velocidad y escala de la epidemia de Covid-19 ha dado como resultado
una relajación de las normas estrictas que rigen los procedimientos
llevados a cabo en laboratorios de diagnóstico clínico acreditados y otros.
Claramente, una consideración primordial para usar cualquier prueba
nueva o modificada, es informar con precisión y sensibilidad, reduciendo
el riesgo de registrar resultados falsos positivos o falsos negativos. Existe
una necesidad urgente de generar estándares mínimos de validación y reporte.
Ciertamente, la inclusión de conocidos negativos y las muestras de
control positivo con cada ejecución de prueba, es un parámetro de
control de calidad esencial. Los cebadores y la sonda específicos del
SARS-CoV-2, deben ser 100% específico para el virus y, por lo tanto,
amplificar solo las secuencias virales. Los cebadores son el componente
más crítico de un ensayo de RT-qPCR confiable, ya que sus propiedades
controlan la exquisita especificidad y sensibilidad que hacen que este
método sea excepcionalmente poderoso.
Cada prueba de diagnóstico debe interpretarse en el contexto de la probabilidad
real de enfermedad, evaluada antes de realizar la prueba en sí. En el panorama
epidemiológico actual, la probabilidad de que las pruebas Covid-19 den resultados
falsos positivos es muy alta, con implicaciones significativas para las personas, el
sistema de salud y la sociedad. Para Covid-19, la evaluación de la
probabilidad previa a la prueba incluye síntomas, historial médico previo
de Covid-19 o presencia de anticuerpos, cualquier exposición potencial a
Covid-19 y la probabilidad de un diagnóstico alternativo. Cuando existe
una baja probabilidad previa a la prueba, los resultados positivos deben
interpretarse con precaución y es necesaria una segunda muestra
probada para confirmación (20).
Si una persona da positivo por PCR y se usa un umbral de 35 ciclos o más
(como se describe en la mayoría de los laboratorios de Europa y EE.UU.),
la probabilidad de que esta persona esté infectada es <3% y la
probabilidad de que el resultado sea un falso positivo es del 97% (21). En
1996, el Dr. Gary Null entrevistó al fallecido Dr. Kary B. Mullis, el inventor de la

ESTUDIO DE LA PANDEMIA
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